浙江抗菌涂料大肠埃希菌检测、 涂料试板评价测试

　1 材料与方法

　　1.1 试验菌种

　　大肠埃希菌ATCC 25922 ( 第6～7 代) , ATCC 6538( 第6～7 代) ,黑曲霉ATCC6275、土曲霉AS 3.3935、宛氏拟青霉AS 3.4253、绳状青霉AS3.3875、出芽短梗霉AS3.3984、球毛壳AS 3.4254, 均由中国生物制品检定所提供。

　　1.2 涂料样品

　　中国涂料协会提供16 份抗菌涂料样品和10 份空白对照样品( 不添加抗菌成分, 其他成分同抗菌涂料) 。

　　1.3 涂料试板的制备

　　选择贴膜纸板为底材, 施涂一遍后, 待表面干燥,再涂第二遍, 涂膜厚度为湿膜小于100 μm, 自然条件下干燥7 d,待完全干燥后, 制成50 mm×50 mm的试板。

　　1.4 抗菌性能试验

　　用无菌水冲洗覆盖膜、阴性对照试板(A) 、空白对照样品试板(B) 和抗菌涂料试板(C) , 分别放入灭菌平皿中,置紫外灯下灭菌后备用。制备试验菌菌悬液[1]

　　,备用。在样品A、B、C 上分别用灭菌吸管均匀接种0.5ml 菌悬液, 接种之后, 用灭菌镊子夹起灭菌覆盖膜覆盖在各样片上,使菌液均匀接触样片, 盖好平皿,

　　在37℃培养箱中( 相对湿度为90%) 放置24 h, 每个样品做3 个平行。

　　取出后分别用20 ml 洗脱液, 充分冲洗,经适当稀释后, 用倾注法做活菌培养计数, 检测其接触24 h后试样上的活菌数。检测各试板接触0 h 后的活菌数。试验重复3 次。按照公式( 1) 和( 2) 计算抑菌率:

1.5 抗霉菌性能试验方法

　　制备霉菌孢子悬液。用无菌水冲洗覆盖膜、阴性对照试板(A) 、空白对照样品试板(B) 和抗菌涂料试板(C) , 分别放入灭菌平皿中,置紫外灯下灭菌后备用。将试板B 和C 分别铺在制备好的平板培养基上, 充分均匀地喷上孢子悬液, 每个样品做3 个平行,在阴性对照平板上也喷上孢子悬液。放置在28 ℃、相对湿度90%的霉菌培养箱内下培养28 d, 观测记录试验结果。