苏州医疗产品细胞毒性检测 钛合金制品生物相容性试验

检测方法

　　细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测，常用以下几种方法:

　　·MTT、XTT法:利用线粒体内部酶的活性，可以将特定的四唑盐类进行转化，通过酶标仪进行检测

　　·LDH(乳酸脱氢酶)的方法:通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性

　　其它酶方法:如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

　　·细胞增殖能力分析试剂盒

　　原理:正常细胞代谢旺盛，其线粒体内的琥珀酸脱氢酶，可将四唑盐类物质(如 MTT、XTT、WST-1等 )还原为紫色的结晶状的物质，沉积在细胞周围，通过酶标仪读取OD值，从而检测到细胞增值状态

　　·荧光素发光法 - 细胞生存能力检测

　　原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中，AK(腺苷酸激酶)具有激活ADP(二磷酸腺苷)生成ATP(三磷酸腺苷)。当细胞受损后，细胞膜发生破损，AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光，通过化学发光仪可以定量进行检测。

　　·LDH法 - 细胞毒性检测

　　原理:LDH(乳酸脱氢酶)是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损，LDH即被释放到细胞外; LDH催化乳酸形成丙酮酸盐，和INT(四唑盐类)反应形成紫色的结晶物质。通过检测细胞培养上清中LDH的活性，可判断细胞受损的程度

部分检测标准

　　BS EN ISO 10993-5-2009医疗器械的生物学评价 第5部分:体外细胞毒性试验 替代BS EN 30993-5:1994

　　DIN 12980-2005实验室设备 细胞毒性物质用安全柜

　　DIN EN ISO 10993-5-2009医疗器械的生物学评价 第5部分:体外细胞毒性试验

　　GB/T 16886.5-2017医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验

　　GB/T 36082-2018纳米技术 特定毒性筛查用金纳米颗粒表面表征 傅里叶变换红外光谱法

　　ISO 10993-5-2009医疗器械的生物学评价 第5部分:体外细胞毒性试验

　　NF EN ISO 10993-5-1999医疗器材的生物评价.第5部分:体外细胞毒性试验

　　XP P41-250-3-2008材料对人饮用水质量的影响.有机材料.第3部分:细胞毒性的测量方法

　　YBB 00012003-2015细胞毒性检查法

　　YY/T 0127.9-2009口腔医疗器械生物学评价 第2单元：试验方法细胞毒性试验：琼脂扩散法及滤膜扩散法

细胞毒性分类：

　　细胞毒性是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程，如细胞膜或细胞骨架结构，细胞的新陈代谢过程，细胞组分或产物的合成、降解或释放，离子调控及细胞分裂等过程，导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱，所引发的不良反应。按作用机制可分3种类型:

　　①基本细胞毒性，涉及一种或多种上述结构或功能的改变，作用于所有类型的细胞;

　　②选择细胞毒性，存在于某些分化细胞上，主要通过化学物质的生物转化，与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发;

　　③细胞特殊功能毒性，对细胞结构和功能损伤轻微，但对整个机体损伤非常严重。