鱼类急性毒性试验,是水生生态毒理学的重要内容之一,并广泛应用于水域环境污染监测工作中,对控制工业废水的排放、保护水域环境、发展渔业生产,制定渔业水质标准,具有重要意义。
实验原理
鱼类对水环境的变化反应十分灵敏,当水体中的污染物达到一定程度时,就会引起一系列中毒反应,例如行为异常、生理功能紊乱、组织细胞病变、直至死亡。在规定的条件下,使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液,实验至少进行24h,**以96h为一个实验周期,在24h、48h、72h、96h时记录实验鱼的死亡率,确定鱼类死亡50%时的受试物浓度。鱼类毒性试验在研究水污染及水环境质量中占重要地位。通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响,以短期暴露效应表明受试物的毒害性。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度,也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。
实验材料
1、试验用鱼的选择与驯养
试验用的鱼必须对毒物敏感,应具有代表性,便于在实验条件下饲养,来源丰富,个体健康。我国可采用的试验鱼有四大养殖淡水鱼(青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼)、金鱼、鲫鱼等。
在同一实验中要求试验鱼必须同属、同种、同龄,**是当年生。鱼的平均体长以7cm以下为宜。金鱼体短、身宽,一般以3cm以下较为合适。同组鱼中*大的体长不应超过*小的体长的1.5倍。
选用的试验鱼在试验前必须在实验室内经过驯养,使之适应实验室条件的生活环境和进行健康选择。驯养鱼应该与试验相同水质水温的水体中至少驯养7天,使其适应试验环境,不应长期养殖(
试验前必须挑选健康的鱼,即选择行动活泼、体色光泽、鱼鳍舒展完整、逆水性强、大小无太大悬殊、无任何疾病的鱼作为试验鱼。任何畸形鱼、外观上反常态的鱼都不得作试验鱼。
2、实验仪器设备
(1)实验容器
实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水族箱或水槽。容器体积可根据试验鱼的体重确定,通常以每升水中鱼的负荷不得超过2g(**为1g),或者其盛水量以每条鱼2~3L为宜。一些小型鱼类幼鱼可选择500mL或1000mL烧杯为实验容器。容器的深度必须超过16cm,水体表面积越大越好。同一实验应采用相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器,可在容器上加上网罩。实验容器使用后,必须彻底洗净,以除去所有毒性残留物。
(2)其他
溶解氧测定仪、水硬度计、温度控制仪、pH计、分析天平。
3、实验用水(稀释水)及水质条件
用来驯养和配制实验液的水,必须是未受污染的清洁水。一般可采用天然河水、湖水或地下水,但需过滤以除去大的悬浮物质。也可用放置3天以上的自来水。如果试验目的是评价工业废水或化学物质对接纳水体的影响时,则**采用接纳水体的污染源上游水作为试验用稀释水。蒸馏水不适合作稀释水,因为蒸馏水中已除去了自然界水中的盐类,与实际差距太大,另外由于蒸馏器的影响,有时使蒸馏水中带有对鱼类不利的金属离子,影响试验结果。
实验用水的水质条件一般是指水的温度、pH、溶解氧、硬度、水中的有机物和水量等。
(1)水温
实验中应保持鱼类原来的适应温度,一般冷水鱼温度为12~18℃,温水鱼温度为20~28℃。为使得实验结果可靠,在同一实验中,温度的波动范围不要超过4(即±2℃)。冬天可以通过加热室内的空气温度达到调节水温的目的,也可以采用电热棒直接控制调节水温。
(2)pH
水的pH与水生生物的代谢作用有密切关系。对毒物的毒性作用也有一定的影响。因此,在实验中应维持pH在鱼类适宜范围内。一般实验液的pH在6.7~8.5为宜。如需调节pH,可用1M或0.1M的HCl和NaOH来调节受试物贮备液的pH。调节贮备液的pH时不能使受试物浓度明显改变,或发生化学反应或沉淀。
(3)溶解氧
溶解氧是鱼类生存的必要条件,它能影响鱼类对毒物的敏感性。一般温水鱼要求溶解氧在4mg/L以上,冷水鱼要求溶解氧在5mg/L以上。
(4)硬度
水的总硬度为10~250mg/L(以CaCO3计)。