NY/T 725-2003饲料中莫能菌素的测定高效液相色谱法
1范围
本标准规定了检测动物饲料中莫能菌素含量的高效液相色谱(HPLC)方法。
本标准适用于配合饲料,浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莫能菌素含量的测定。本方法检测限为5 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有修改单(不包括勘误内容)或修改版均不适合本标准,然而﹐鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T14699.1饲料采样方法
3方法原理
用甲醇-水提取试样中的莫能菌素﹐以甲醇-冰乙酸-水作为流动相、香草醛为衍生剂,用高效液相色谱-柱后衍生化-紫外检测法分离测定。
4试剂和溶液
除非另有说明,本法所用试剂均为分析纯,水为去离子水,符合GB/T 6682二级用水的规定。
4.1试样提取液:[甲醇(色谱纯)＋水](90+10)-
4.2香草醛衍生液:量取5 ml.浓硫酸,缓慢加人到250 mL甲醇中,置冰水浴中,缓缓加入20g香草醛,混匀,脱气后避光保存,临用现配。
4.3莫能菌素标准液:
4.3.1―莫能菌素标准贮备液:准确称取莫能菌素标准品(纯度≥90%)0.100 0 g,置于 100mL容量瓶中,用甲醇溶解,定容﹐其浓度为1 000 ug/mL的储备液﹐置4℃冰箱中保存。
4.3.2莫能菌素标准工作液:分别准确吸取一定量的标准贮备液(4.4.1),置于10mL容量瓶中,用甲醇稀释、定容,配制成浓度为2.0 pug/mL.,4.0 pg/ml.,6. 0 ug/mI.,8.0ug/mL.,10.0 ug/ml.12.0 pug/ml.的标准工.作液。
5仪器和设备
实验室常用仪器、设备。
5.1高效液相色谱仪:配柱后衍生化装置和紫外检测器。
5.2离心机。
5.3振荡器。
5.4玻璃具塞三角瓶(250 mL)。
5.5微量进样器。
5.6微孔滤膜(0.45 um).
