饲料黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量检测

GB/T 30955—2014

饲料中黄曲霉毒素、B2G,G2的测定

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中黄曲霉毒素B,Bp .G ,G。的免疫亲和层析净化-高效液相色谱法的测定方法。

本标准适用于饲料中黄曲霉毒素B.B2.G.Gg的测定。

本标准的检测限;黄曲霉毒素B为0.2 ug/kg ,黄曲霉毒素B为0.2 pug/kg,黄曲霉毒素G，为0.3 pg/kg,黄曲霉毒素G。为 0.3 pg/ kg。

本标准的定量限;黄曲霉毒素B为 1.0 ug/kg ,黄曲霉毒素B为1.0 ug/kg,黄曲霉毒素G为1.0 pg/kg,黄曲霉毒素G。为1.0 u.g/ kg。

2规范性引用文件

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GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 14699.1饲料采样

GB/T 20195动物饲料试样的制备

3原理

试样经过甲醇-水提取后,提取液经过滤,稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析柱层析净化,经高效液相色谱仪分离,荧光检测器柱后光化学衍生测定黄曲霉毒素B,BG),G。的含量。

4试剂

除非另有说明,均为分析纯的试剂;实验室用水符合GB/T 6682中二级用水规定,标准溶液和流动相用水符合一级用水规定。

4.1甲醇:色谱纯。

4.2苯:色谱纯。4.3乙腈:色谱纯。

4.4甲醇＋水(8＋2):取80 mL甲醇(4.1)加 20 mL水,混合均匀。

4.5甲醇＋水(45十55):取45 mL甲醇(4.1)加 55 mL水,混合均匀。

4.6苯＋乙腈(98＋2):取2 mL乙腈(4.3)加入 98 mL苯(4.2) ,混合均匀。

4.7︰黄曲霉毒素标准储备溶液;用苯＋乙腈(98＋2)溶液(4.6)分别配制o.100mg/ml.的黄曲霉毒素B.B.G.Gg标准储备液,保存于4℃备用,可使用1年。

4.8黄曲霉毒素混合标准工作液:准确移取适量的黄曲霉毒素B.B .G),G。标准储备溶液(4.7)，