饲料中暖唑烷硫酮的测定方法
1范围
本标准规定了饲料中蟋唑烷硫酮的紫外分光光度测定方法。
本标准适用于菜籽及其加工产品,以及含有菜籽及其加工产品的配合饲料,浓缩饲料和精料补充料中髦唑烷硫酮的测定。
本标准方法的定量限为150 mg/kg。
2规范性引用文件
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GB/T 5520粮油检验发芽试验
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 20195动物饲料试样的制备
3原理
试样中的硫代葡萄糖苷在pH7.0缓冲液中,在白芥子酶作用下水解生成异硫氰酸酯,用二氯甲烷萃取后,带羟基的异硫氰酸酯与乙醇反应,环化生成唔唑烷硫酮,用紫外分光光度法测定。
4试剂或材料
除非另有规定﹐仅使用分析纯试剂。
4.1 水:GB/T 6682,二级。
4.2石油醚(沸程30 ℃一6o ℃)。
4.3二氯甲烷。
4.4无水乙醇。
4.5柠檬酸溶液(o.l mol/L):准确称取4.20 g柠檬酸(C,H O。·H.O)溶解于水中,用水稀释并定容至200mL,混匀。临用现配。
4.6﹑磷酸氢二钠(o.2 mol/L):准确称取28.39g无水磷酸氢二钠(Na,HPO,)溶解于水中,用水稀释并定容至1L,混匀。临用现配。
4.7盐酸(o.01 mol/L):准确移取0.9 mL浓盐酸﹐用水稀释并定容至1L,混匀。
4.8氢氧化钠溶液(0.01 mol/L):准确称取0.40 g氢氧化钠加水溶解,用水稀释并定容至1L,混匀。
4.9 pH7.0缓冲溶液:量取176.5 mL柠檬酸溶液(4.5)于1 000mL.容量瓶中,用磷酸氢二钠溶液(4.6)稀释并定容至1 000mL,混匀,用盐酸溶液(4.7)或氢氧化钠溶液(4.8)调整pH至7.0。临用现配。
4.10白芥子酶:称取50 g白芥(Sina pis alba L.)种子(按照GB/T 5520做发芽率试验,72h内发芽率须大于85%,保存期不超过两年)粉碎后,置于500 mL.烧杯中,加入 100 ml.石油醚(4.2),搅拌2min,静置,弃去上层液体,重复脱脂10次,使脂肪含量低于2%‰,置通风橱内使溶剂挥干,再粉碎一次，
