干细胞对细胞的诱导分化功能检测干细胞分化潜能检测干细胞质量检测

干细胞质量检测-飞凡检测

2019年ISSCR上，WiCell ResearchInstitute（下文中简称为WiCell）发表了一篇关于人多能干细胞（hPSC）质量的poster，文中强调了细胞质量对研究的重要性。低质量的细胞会影响实验结果的重现性、导致错误的实验、浪费时间、消耗资源。

WiCell一共收集了来自31个不同实验室的1732株iPS细胞系，截止到poster发表之日，一共有839株细胞系已经完成检测，并且这839株细胞系已被提供给了更多的科研机构和院所，但令人震惊的是，其中超过1/3的细胞株（285株细胞系）未通过WiCell的常规细胞质量测试！WiCell进行的细胞质量鉴定项目（括号内为实际检测机构），包括

•  解冻复苏及使用光学显微镜观察的自发分化（WiCell）

•  核型检测：G-banding（WiCell）

•  均一性：使用Promega PowerPlex 16 HS System检测Short Tandem Repeat(STR) （UW‐Madison Hospitals and Clinics）

•  无菌测试（Bacteriostasis/Fungistasis）：使用direct transfermethod进行14天的培养（Steris）

•  支原体检测：使用Lonza Mycoalert或Biological Industries EZ PCRMycoplasma Kit（WiCell）

•  如上图所示，这285株未通过细胞质量标准的原因如下：

•  61%的细胞系的核型发生改变，其中54%的核型异常原因为recurrentabnormalities，balanced translocation出现的核型异常占20%。

•  10%的细胞系发生STR异常，包括细胞系的交叉污染、身份错配或性别错配。实际情况可能更为严重，由于某些同一性别的特定细胞系也可能被错误识别而未能检测出。

•  超过25%的细胞系（80株以上）冻存后无法复苏，或无法进行贴壁、无法扩增或是分化区域太多。

•  12株细胞系未通过无菌测试，1株细胞系支原体检测阳性。

•  细胞质量对hPSC研究至关重要，获得高质量的hPSC是研究成功的必要条件，而在日常对hPSC进行维持培养的过程中也应选择高质量的hPSC培养基并定期对细胞进行质量监控。

飞凡检测生物依托拥有多年服务经验的技术团队和先进的仪器设备，并严格按照《干细胞制剂制备与质检行业标准（试行）》中提及的10种必检项目及检测要求，快速地为客户提供全方位的干细胞质量检测服务。

质量检测是为了保证干细胞经特定体外处理后对其安全性、有效性和质量可控性进行较全面的质量检测，包括但不限以下10各方面：

细胞鉴别：细胞形态、遗传学、代谢酶亚型谱分析、表面标志物鉴定、特定基因表达产物鉴定。

存活率及生长活性：活细胞计数、细胞倍增时间检测、细胞周期检测、克隆形成率、端粒酶活性检测等。

纯度和均一性：细胞表面标志物鉴定、遗传多态性、特定生物学活性。

无菌试验和支原体检测：依据现行版《中华人民共和国药典》中的生物制品无菌试验和支原体检测流程。

细胞内外源致病因子检测：牛源特定病毒的检测（如使用过牛血清）；猪源细小病毒检测（如使用过胰酶等猪源材料等。

内毒素检测：应根据现行版《中华人民共和国药典》中的内毒素检测流程。

异常免疫学反应（异体来源）：对人总淋巴细胞增殖、对不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响、对相关细胞因子分泌的影响。

致瘤性：免疫缺陷动物体内致瘤试验。

生物学效力试验：检测干细胞分化潜能、诱导分化细胞的结构和生理功能、对免疫细胞的调节能力、分泌特定细胞因子、表达特定基因和蛋白。

培养基及其他添加成分残余量检测：牛血清蛋白、抗生素、细胞因子等残留检测。