CHO细胞鉴别 CHO细胞形态观察 CHO细胞库检定

CHO细胞简介

CHO细胞属于成纤维细胞，是一种非分泌型细胞，它本身很少分泌CHO内源蛋白，对目标蛋白分离纯化工作十分有利。可形成有活性的二聚体(如白介素2)，具有糖基化的功能(如EPO),CHO为表达复杂生物大分子的理想宿主。该细胞存在遗传缺陷，无脯氨酸合成基因，不能将谷氨酸转变为谷氨酸-半醛，培养过程中需在培养基中添加L-脯氨酸才能生长。并且由于该细胞已经霍乱毒素适应，形态学有所改变。Zui初细胞为贴壁型细胞，经多次传代筛选后，也可悬浮生长。

CHO细胞特性

CHO细胞虽可像微生物细胞一样，在人工控制条件的生物反应器中进行大规模培养，但其细胞结构和培养特性与微生物细胞相比，有显著差别:动物细胞比微生物细胞大得多，无细胞壁，机械强度低，对剪切力敏感，适应环境能力差;倍增时间长，生长缓慢，易受微生物污染，培养时须用抗生素;培养过程需氧量少;培养过程中细胞相互粘连以集群形式存在，原代培养细胞一般繁殖50代即退化死亡;代谢产物具有生物活性，生产成本高，但附加值也高。

CHO细胞结构

具有不死性，可传百代以上，是生物工程广泛使用的细胞系

属于成纤维细胞，可贴壁培养，经多次传代筛选后也可悬浮培养

一种非分泌细胞，本身很少分泌内源蛋白，对目标蛋白分离纯化十分有利

形成有活性二聚体，具有糖基化功能，是表达复杂生物大分子的理想宿主

CHO细胞表达系统优点

具有准确的转录后修饰功能，表达的糖基化药物蛋白分子在分子结构.理化特性和生物学功能更接近天然蛋白分子

具有产物胞外分越功能，便于下游产物分离纯化

具有重组基因的高效扩增和表达能力

具有贴壁生长特性，可以进行悬浮培养，具有较高的表达能力

CHO细胞的一些问题

构建重组CHO细胞生产效率低，产物浓度也低

某些糖基化表达产物不稳定，不方便纯化

重组细胞上游构建与下游分离纯化脱节,主要表现在，上游高效表达与下游有效提取之间的矛盾

重组细胞培养费用昂贵，自动化水平低下

CHO细胞展望

随着以CHO细胞为主的动物细胞表达系统日益完善,动物细胞将成为基因工程药物的主要宿主细胞.研发人员将对以下问题进行主要研究

1.提高表达水平，如发展些新的强启动 子，装配适合于高效表达的必要元件

2.在提高表达的注重下游分离纯化，如改变中的个别序列，使表达产物在不影响生物活性的前提下携带有利于分离纯化的基团

3.细胞培养成本的控制，高密度高产量和培养设备的大型化自动化和精窍化

4.分离纯化的低成本和高活性回收率