细胞STR(Short TandemRepeat,短串联重复序列)鉴定是一种用于细胞鉴定和个体身份认定的技术。STR基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列拷贝数的不同来区分,在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别,随后通过一定的计算方法,即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。
细胞STR鉴定的依据标准是ATCCASN-0002标准,该标准规定了采用STR分型对细胞株进行鉴定时,需要比对8个核心位点以及Amelogenin位点,这些位点包括D5S818、TPOX、CSF1PO、TH01、vWA、D7S820、D16S539及D13S317。通过比对这些位点的STR分型结果,可以确认细胞身份,并检测细胞是否与某些细胞发生交叉污染。第三方检测机构的试剂盒检测位点可能不止这9个位点,苏州鉴达(GeneticTesting Biotechnology, GTB)的人源细胞试剂盒可以检测多达23个位点。
STR鉴定应用于细胞鉴定具有准确度高、自动化程度高、快速可靠等优点。该技术已被广泛用于判断人鼠细胞混淆的情况,检测细胞是否发生交叉污染或者误认的情况,保障细胞质量和实验结果的可靠性。细胞STR鉴定也用于遗传学、法医学、亲子鉴定、个体识别等领域。
进行细胞STR鉴定的主要步骤包括:样品准备、DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳分离和荧光检测。需要准备待检测的细胞样品,并提取其中的DNA。通过PCR技术扩增STR基因座位上的特定区域,扩增产物经过毛细管电泳分离后,利用荧光检测仪进行检测。检测结果将被计算机自动进行分析,Zui终得出STR分型结果。
在进行细胞STR鉴定时,需要注意以下几点:要选择高质量的细胞样品,避免污染和交叉污染。要采用可靠的DNA提取方法和试剂,以保证DNA的质量和纯度。PCR扩增和毛细管电泳分离是关键的步骤,需要采用经过验证的试剂和方法,确保结果的准确性和可靠性。Zui后,需要对STR分型结果进行正确的解读和比对,以便得出准确的鉴定结论。