基因敲除技术是一种基于基因同源重组原理的分子生物学技术，用于对特定基因进行敲除或替换。该技术通常采用基因敲除载体将目的基因敲除，通过同源重组将载体中的序列与受体细胞基因组中的相应序列进行替换，从而实现基因敲除。一般用小鼠做实验模型的比较常见。
基因敲除小鼠模型的构建主要包括以下几个步骤：
设计并合成与靶基因同源的基因敲除模板。这个模板可以包含两部分，一部分是同源臂，另一部分是基因敲除序列，其长度一般为200~500bp。
通过显微操作将基因敲除模板注射到胚胎的受精卵中。这一步通常需要在显微镜下操作，将基因敲除模板注射到受精卵的细胞质中或直接注射到胚胎的囊胚期细胞中。
将注射了基因敲除模板的受精卵移植到daiyun母鼠的子宫内，使其发育成为基因敲除小鼠。这一过程中，daiyun母鼠需要接受激素处理，以接受外来受精卵。
对基因敲除小鼠进行筛选和鉴定。这一步骤通常需要使用PCR和Southern blot等技术，对小鼠的基因组进行分析，以确定其是否成功地敲除了目标基因。
繁殖和育种。一旦确定了基因敲除小鼠，就需要进行繁殖和育种，以获得更多的基因敲除小鼠。