食饮具消毒模拟现场试验的目的:
用于鉴定消毒剂对医疗器械上细菌芽孢的杀灭作用作用,并测出消毒所需使用剂量,作为确定对医疗器械处理时实用剂量的参考。
试验器材:
(1)大肠杆菌(8099)。对尚需用于杀灭其他特定细菌者,可增用该特定细菌进行试验。菌悬液制备按2.1. 1.2规定的方法和要求进行。
(2))磷酸盐缓冲液(PBS, 0. 03mol/L, pH7. 2)
(3)采样液(在PBS中加入相应的中和剂)
(4)稀释液
(5)中和剂(按2. 1. 1.5方法鉴定合格者)
(6)胰蛋白胨大豆琼脂培养基
(7)无菌棉拭
(8)规格板(用可略弯曲的软性材料制备,中央留一大小为5. 0cmX5. 0cm空格作为采样部位)。
(9)试验用食(饮)具样本瓷碗(盘)和竹或木筷前端12. 5cm(周长约2. 0cm,长度为12. 5cm,总面积约25cm2)各35个。
操作程序:
(1)按产品使用说明书的用法,选定本试验拟用浓度和作用时间,分别进行大肠杆菌杀灭试验。
(2)用无菌规格板在试验用瓷碗( 盘)中间标出染菌区(5. 0cmX 5.0cm)。用无菌吸管吸取菌悬液,分别滴加于染菌区,每区0.1ml,用无菌L棒在区内涂匀,并置37°C恒温箱干燥。对筷子取前端12. 5cm长度,蘸染预定 量菌液后,并置37°C或室温干燥。
(3)将30个染菌碗和30个筷子样本,缓缓放入含消毒剂溶液的容器中,使其完全浸没。待作用至规定时间后,将碗轻轻取出,弃掉消毒剂,分别向磁盘内的染菌区加入5ml采样液,用L棒刮洗染菌区,作用10min,分别取1. 0ml样液倾注接种2块平皿。将筷子轻轻取出,放入含15ml采样液的试管中,电动混匀器震荡20s或振敲80次,作用10min,分别取1. 0ml样液倾注接种2块平皿。将接种好的平皿放37°C恒温箱培养48h,计数菌落数,作为试验组。
(4)试验中,应设阳性对照组与阴性对照组。阳性对照组的食具与试验组同法染菌,置同样条件下,将5个染菌碗和5只筷子样本浸泡于含有PBS的容器中。待试验组消毒处理完毕后,与试验组进行采样和检测。所得细菌定量检测结果作为消毒前菌量。阳性对照组所测得的菌量应在1.25X105 cfu/样本~ 1.25X106cfu/样本(相当于5X 105cfu/cm2 ~5X 106cfu/cm2)。.
(5)待试验组与阳性对照组试验结束后,将未用过的同批次中和剂、PBS 接种培养基,和未种菌的培养基等,与上述两组样本进行培养,作为阴性对照。若有菌生长,更换培养基、PBS或中和剂,重新进行试验。
(6)按下式计算每件食具上的生长菌落数。
每件食具样本生长菌落数(cfu/样本) =平板上平均菌落数X检测时样本稀释倍数
(7)计算杀灭对数值。
试验结果:
以每种食(饮)具30个样本中大肠杆菌杀灭对数值均≥3.00,所用消毒剂的浓度和作用时间为消毒合格剂量。
试验结论:
平均杀灭对数值≥3.00,则该消毒品合格。
飞凡检测可依据《消毒技术规范》2002版进行对食饮具消毒效果的模拟现场鉴定试验测试,报告具有CMA/CNAS资质