双向差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference gelelectrophoresis,2D-DIGE)是一种新出现的荧光标记的定量蛋白质组学技术,比经典的2-DE具有更高的动力学范围和灵敏性。
这种技术是在传统的双向凝胶电泳基础上发展而来的。其利用电荷和分子量的差异分离蛋白质混合物,并通过多通道激光扫描分析不同蛋白质的第二向SDS-PAGE凝胶图像。与传统的凝胶电泳技术相比,2D-DIGE技术具有更高的灵敏度和分辨率,能够更准确地检测和比较不同蛋白质之间的差异。
2D-DIGE技术采用专有的荧光染料与多重样本和图象分析的方法,在同一块胶上可分离多个由不同荧光标记的样品。这些荧光染料与蛋白质结合后,可以在紫外光下发出荧光,从而实现对蛋白质的定量和定性分析。通过比较不同样品之间荧光信号的差异,可以找出蛋白质表达水平的变化,从而揭示蛋白质的功能和调控机制。
2D-DIGE技术具有以下优点:
高通量:可以在同一块凝胶上分析多个样品,大大提高了分析效率。
高灵敏度:由于采用了荧光标记技术,使得对低丰度蛋白质的检测更加敏感。
高重复性:通过内标的方式,可以减少实验误差,提高结果的可靠性。
定量准确:可以对蛋白质的表达水平进行jingque定量,为蛋白质组学研究提供了有力工具。