目的
法规要求
常用病毒清除工艺
层析法:包括亲和层析和离子交换层析,常用于单克隆抗体和融合蛋白的纯化。
低pH灭活法:在pH3.0和4.0之间进行,能有效灭活包膜病毒。
S/D灭活法:使用有机溶剂和表面活性剂灭活包膜逆转录病毒。
过滤法:利用纳米过滤材料去除病毒颗粒,尤其是较大的病毒颗粒。
验证过程
毒种选择:根据相关法规要求,选择与潜在污染病毒相似且易于体外培养的指示病毒。
毒种浓度:确保毒种浓度足够高,以便在清除后能够检测到残留病毒。
病毒去除参数考察:考虑Zui差条件,如Zui高的病毒滴度、Zui短的处理时间等。
工艺放大:从小规模实验到商业化规模的放大过程中,保持工艺一致性,并进行必要的参数考察。
验证要点
病毒滴度检测:使用qPCR等方法进行病毒滴度的定量分析,但需注意检测方法的局限性和系统误差。
设备确认:对病毒灭活/去除工艺所用到的设备进行充分的确认。
日常参数控制:在生产中对各类参数进行严格控制,以保证工艺的有效实现。