蜂蜜淀粉酶值是反映蜂蜜新鲜度及其营养程度的一项重要指标,酶值越高,营养价值越好。蜂蜜淀粉酶在一定状态下酶解淀粉,一定时间后剩余淀粉与检测试剂合成紫,随着反应的进行,其蓝紫色反应逐渐消失。用分光光度计于660nm波长处测定其达到特定吸光度所反应的时间,换算出1g蜂蜜在1h内水解1%淀粉的毫升数。
具体的检测步骤如下:
淀粉溶液的标定:吸取5.0 mL淀粉溶液和10.0 mL水并分别置于40 ℃水浴中15 min。将淀粉溶液倒入10.0 mL水中并充分混合后,取1.0 mL加到10.0 mL 的碘溶液中,混匀,用一定体积的水稀释后,以水为空白对照,用分光光度计于660 nm波长处测定吸光度,确定产生0.760±0.02吸光度所需稀释水的体积数,并以此体积数作为样品溶液的稀释系数。当淀粉来源改变时,应重新进行标定。
样品处理:称取5 g 混合均匀的试样,jingque到 g。置于20 mL烧杯中,加入15 mL水和2.5mL乙酸盐缓冲液(pH5.3)后,移入含有1.5 mL氯化钠溶液(0.5mol/L)的25 mL容量瓶中并定容。
测定:吸取5.0 mL淀粉溶液、10.0 mL 样品溶液和10.0 mL 碘溶液,分别置于40 ℃水浴中15min。将淀粉溶液倒入样品溶液中并充分混合后开始计时。5 min时取1.0 mL样品混合溶液加到10.0 mL的碘溶液中,再用淀粉溶液标定时确定的水的体积数进行并用前后倾斜的方式充分混匀后,以水为空白对照,用分光光度计于660 nm波长处测定吸光度。如果吸光度大于0.235(特定吸光度),应继续按上述步骤重复操作,直到吸光度小于0.235为止。
计算:在对数坐标纸上,以吸光度(%)为纵坐标,时间(min)为横坐标,将所测的吸光度与其相对应的时间在对数坐标纸上标出,连接各点划一直线。从直线上查出样品溶液的吸光度与0.235交叉点上的相应时间,结果按公式X=300/t计算,其中X为样品溶液中的淀粉酶值,单位为毫升每克小时[mL/(g·h)];t为对应时间,单位为分(min)。
需要注意的是,蜂蜜淀粉酶值的高低具有一定的营养价值,成熟的蜂蜜淀粉酶值高,较低。蜂蜜在加工前后的淀粉酶值可以反映这种加工工艺的优劣,蜂蜜在贮藏前后的淀粉酶值的变化也可以检验贮藏方法的优劣以及蜂蜜的贮藏时间。