4人造板防霉性能检验方法
4.1 仪器设备与器皿
4.1.1蒸汽高压灭 菌器:Zui高设计温度138 C ,Zui高设计压力0. 25 MPa.
4.1.2超净工作 台:洁净等级不低于100级。
4.1.3恒温恒湿培养箱:控温范围(0~65)°C ,控湿范围60% ~90%.
4.1.4天平:感量0.01 g.
4.1.5移液器:1 0000 μL。
4.1.6离心机:转速≥5 000 r/min.
4.1.7生物光学 显微镜:40X ~400X.
4.1.8 血球计数板:医学和微生物学实验用。
4.1.9 培养皿:直径90 mm.
4.1.10酒精灯 、烧杯、镊子等。
4.2主要材料及准 备
4.2.1无菌滤纸
定性试纸,尺寸为(25士1) mmX (25士1)mm,置于121C .0.1 MPa压力蒸汽灭菌器中保持30 min
灭菌后备用。
4.2.2灭菌处理
培养皿.试管和移液器枪头等需要灭菌的用品,使用前需用普通报纸或牛皮纸袋包装好后,置于压
力蒸汽灭菌器中,用温度121C、压力0.1 MPa,灭菌30 min.
4.3试剂和培养基
4.3.1消毒剂:75%乙醇溶液。
4.3.2润湿剂:吐 温80、N甲基乙磺酸(N methyltaurine).二辛磺化丁二酸钠(Dioctyl SodiumSulp-
hosuccinate)中任选- - .
4.3.3察氏(Czapek)培养基 :
-硝酸钠(NaNO3),2.0 g;
磷酸氢二钾(K;HPO,),1.0g;
氧化钾(KCI),0.5 g;
硫酸镁(MgSO,●7H2O),0.5 g;
.硫酸亚铁(FeSO,),0.01 g;
.蔗糖,30 g.
取上述成分加入1 000 mL 0. 05%润湿剂水溶液中,加热溶解后,用0.1 mol/L NaOH溶液调节
pH使其在(25士1)C时pH为6. 5,分装后置压力蒸汽灭菌器内121 C .0.1 MPa压力灭菌30 min.
上述1 000 mL培养液中加入15 g琼脂,加热熔化,用0.1 mol/L NaOH溶液调节pH使其在
(25士1)C时pH为6. 5,配制固体培养基,分装后置压力蒸汽灭菌器内121 C、0. 1 MPa压力灭
菌30 min.
4.3.4马铃薯-葡 萄糖培养基(PDA): .
去皮马铃薯,200 g;
蔗糖,(20~30)g;
琼脂,(15~20)g;
-蒸馏水,1000 mL.
洗净去皮马铃薯200 g,切成小块,加水适量煮沸30 min后过滤,在过滤液中加入葡萄糖20 g、琼脂
(20~25)g,加水定容至1000 mL,再加热,待琼脂溶化后分装在3个500 ml细口三角瓶内,瓶口加棉
花塞并包防水纸,置于蒸汽灭菌器中,压力0.1 MPa,温度121 C,灭菌30 min.灭菌后的培养基先放
于无菌室或超净台上冷却至不烫手时,倒人已灭菌的培养皿(直径10 cm)中,每个培养皿(15~20)mL,
制成平板培养基备用。
