《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法是一种用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器械、原料、辅料及其他品种是否无菌的标准化方法。以下是对该无菌检查法的详细解读:
一、定义与目的
无菌检查法系用于检查上述各类物品是否无菌,若供试品符合无菌检查法的规定,则表明供试品在该检验条件下未发现微生物污染。
二、检查条件与要求
无菌环境:无菌检查应在无菌条件下进行,试验环境必须达到无菌检查的要求。检验全过程应严格遵守无菌操作,防止微生物污染,且防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。
洁净度确认:单向流空气区域、工作台面及受控环境应定期按医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。
隔离系统验证:隔离系统应定期按相关的要求进行验证,其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。
日常监测:日常检验需对试验环境进行监测。
三、培养基与制备
硫乙醇酸盐流体培养基:主要用于厌氧菌的培养,也可用于需氧菌的培养。其制备方法如下:
成分:胰酪胨、酵母浸出粉、葡萄糖(或无水葡萄糖)、L-胱氨酸、硫乙醇酸钠(或硫乙醇酸)、氯化钠、新配制的0.1%刃天青溶液、琼脂、水。
制备步骤:除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微温溶解,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,加入葡萄糖和刃天青溶液,摇匀,再调节pH,使灭菌后在25℃的pH值为7.1±0.2。分装至适宜的容器中,灭菌。在供试品接种前,培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3,否则需经100℃水浴加热至粉红色消失(不超过20分钟),迅速冷却,只限加热一次,并防止被污染。
胰酪大豆胨液体培养基:用于真菌和需氧菌的培养。其制备方法如下:
成分:胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、葡萄糖(或无水葡萄糖)、氯化钠、磷酸氢二钾、水。
制备步骤:除葡萄糖外,取上述成分混合,微温溶解,滤过,调节pH使灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2,加入葡萄糖,分装,灭菌。
四、检查方法
无菌检查方法通常包括薄膜过滤法和直接接种法。薄膜过滤法适用于可溶于水的液体、不溶于水的液体、水溶性固体、非水溶性固体以及气体等类型的供试品;而直接接种法则适用于无法用薄膜过滤法进行无菌检查的供试品。
五、结果判断
若供试品在规定的培养条件下培养14天后,所有培养基均无微生物生长,则判为供试品符合无菌检查法的规定。若有微生物生长,则判为供试品不符合无菌检查法的规定。
六、注意事项
在进行无菌检查时,应严格按照《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法的规定进行操作。
培养基的制备、灭菌以及保存等过程应严格控制条件,以确保培养基的质量和无菌性。
在进行无菌检查时,应注意防止外部微生物的污染和交叉污染。
《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法是一种科学、严谨、标准化的检查方法,对于确保药品、生物制品、医疗器械等产品的无菌性具有重要意义。