中国药典2020年版 四部 通则 1101 无菌检查法

《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法是一种用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器械、原料、辅料及其他品种是否无菌的标准化方法。以下是对该无菌检查法的详细解读：

一、定义与目的

无菌检查法系用于检查上述各类物品是否无菌，若供试品符合无菌检查法的规定，则表明供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

二、检查条件与要求

1. 无菌环境：无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求。检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，且防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。

2. 洁净度确认：单向流空气区域、工作台面及受控环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。

3. 隔离系统验证：隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。

4. 日常监测：日常检验需对试验环境进行监测。

三、培养基与制备

1. 硫乙醇酸盐流体培养基：主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养。其制备方法如下：

• 成分：胰酪胨、酵母浸出粉、葡萄糖（或无水葡萄糖）、L-胱氨酸、硫乙醇酸钠（或硫乙醇酸）、氯化钠、新配制的0.1%刃天青溶液、琼脂、水。

• 制备步骤：除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，再调节pH，使灭菌后在25℃的pH值为7.1±0.2。分装至适宜的容器中，灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/3，否则需经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。

2. 胰酪大豆胨液体培养基：用于真菌和需氧菌的培养。其制备方法如下：

• 成分：胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶水解物、葡萄糖（或无水葡萄糖）、氯化钠、磷酸氢二钾、水。

• 制备步骤：除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，滤过，调节pH使灭菌后在25℃的pH值为7.3±0.2，加入葡萄糖，分装，灭菌。

四、检查方法

无菌检查方法通常包括薄膜过滤法和直接接种法。薄膜过滤法适用于可溶于水的液体、不溶于水的液体、水溶性固体、非水溶性固体以及气体等类型的供试品；而直接接种法则适用于无法用薄膜过滤法进行无菌检查的供试品。

五、结果判断

若供试品在规定的培养条件下培养14天后，所有培养基均无微生物生长，则判为供试品符合无菌检查法的规定。若有微生物生长，则判为供试品不符合无菌检查法的规定。

六、注意事项

1. 在进行无菌检查时，应严格按照《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法的规定进行操作。

2. 培养基的制备、灭菌以及保存等过程应严格控制条件，以确保培养基的质量和无菌性。

3. 在进行无菌检查时，应注意防止外部微生物的污染和交叉污染。

《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法是一种科学、严谨、标准化的检查方法，对于确保药品、生物制品、医疗器械等产品的无菌性具有重要意义。