

转基因大豆(如 Roundup Ready™ 大豆,含 CP4-EPSPS 基因)是全球Zui常见的转基因作物之一。为确保食品安全和贸易合规,需进行转基因成分检测。以下是详细的检测方法、标准及流程。

| 方法 | 原理 | 适用场景 | 检测限 |
|---|---|---|---|
| PCR(聚合酶链式反应) | 扩增特定转基因片段(如 35S启动子、NOS终止子、CP4-EPSPS) | 实验室精准检测(定性/定量) | 0.1%~0.01% |
| 实时荧光定量PCR(qPCR) | 荧光探针定量目标DNA(如 MON87701、MON89788 等品系) | 高灵敏度定量(法规合规检测) | 0.01%~0.001% |
| LAMP(环介导等温扩增) | 恒温条件下快速扩增DNA,适合现场检测 | 快速筛查(无复杂设备需求) | 0.1%~1% |
| ELISA(酶联免疫吸附) | 检测转基因蛋白(如 CP4-EPSPS) | 食品加工过程监控(非DNA检测) | 0.1%~1% |
| NGS(高通量测序) | 全基因组测序,检测未知转基因事件 | 科研、新转基因品 |

DNA提取(CTAB法/商业化试剂盒)
大豆粉、豆粕、豆油等样品需研磨均匀。
使用 SDS/CTAB缓冲液 裂解细胞,氯仿抽提DNA。
乙醇沉淀DNA,溶解于 TE缓冲液(pH 8.0)。
检测DNA浓度(A260/A280≈1.8~2.0)。
引物/探针设计(针对特定转基因元件):
| 目标基因 | 引物序列(示例) | 检测品系 |
|---|---|---|
| 35S启动子 | F: 5'-GCTCCTACAAATGCCATC-3' | 通用筛查(多数转基因) |
| NOS终止子 | R: 5'-GATAGTGGGATTGTGCGT-3' | 通用筛查 |
| CP4-EPSPS | Probe: FAM-CCACGTCTTCAAAGCA-TAMRA | Roundup Ready™大豆 |
| Lectine(内参) | F: 5'-GCCCTCTACTCCACCCCA-3' | 大豆DNA提取质量控制 |
反应体系(25 μL):
2× TaqMan Master Mix(12.5 μL)
引物/探针(各0.5 μM)
DNA模板(50~100 ng)
ddH₂O 补至25 μL
qPCR程序:
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95℃ 10 min(预变性) → 40 cycles: 95℃ 15 s → 60℃ 1 min(荧光采集)Ct值(阈值循环数):
内参基因(Lectine) Ct < 30(确保DNA质量合格)。
转基因靶标 Ct < 35(判定阳性)。
定量计算(若需百分比含量):
GMO%=2−Δ��(转基因-内参)2−Δ��(标准品-内参)×GMO%=2−ΔCt(标准品-内参)2−ΔCt(转基因-内参)×
| 标准 | 适用范围 | 检测限要求 |
|---|---|---|
| ISO 21569/21570 | 转基因成分定性/定量(国际通用) | 0.1%~0.9% |
| GB 19495.2-2004 | 中国转基因植物检测(PCR法) | 0.1% |
| 欧盟 (EC) No 1829/2003 | 欧盟市场转基因食品标签阈值(0.9%) | 0.1% |
| USDA GIPSA | 美国大豆贸易检测标准 | 0.01%~1%(依合同) |
| 成立日期 | 2021年10月19日 | ||
| 法定代表人 | 汤俊平 | ||
| 注册资本 | 1000 | ||
| 主营产品 | 建筑石材检测,生物质检测,水质检测 | ||
| 经营范围 | 检验检测服务;室内环境检测;放射性污染监测;建设工程质量检测;认证服务;船舶检验服务;特种设备检验检测;农产品质量安全检测;职业卫生技术服务;安全评价业务;机动车检验检测服务;水利工程质量检测 | ||
| 公司简介 | 广分检测(GFQT),于2016年创建于广东广州,数年来一直专注于检测及认证行业,目前拥有了数十名技术人员。公司以团队为技术支撑,一站式全方位服务的模式,获得国内外众多客户一致好评;解决了不知如何送检,送检手续繁琐,咨询回复慢等问题!送检方式多样化,可以上门、快递,全程智能化,可线上咨询填单、快递送检,电子版报告,真正做到足不出户,送检无忧。为了更好的服务广大客户群体,让送检更加便捷、高效!目前公 ... | ||