抗原制备及纯化
抗原制备: 参照文献[10]制备 MRJ 抗原。复苏pET28a-mrj 转 Rosetta 菌0种 接 种 于 具 Kana抗 性 的10 mL液体培养基中的,37 ℃ 培养过夜,次日以 1∶ 50转瓶进行扩大培养,当菌液 OD600达 0. 6时加入浓度为 5 mmol /L 的 IPTG,HRP,37 ℃ 诱导 8 h超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验,有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化: 以 5 × 10 -4 mol /L浓度的IPTG,37 ℃ 条件下大量诱导( 200 mL 菌液) 8 h 后收集样品,超声裂解后将所得 MRJ 蛋白过 Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于 90% ,可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。
产品描述
抗原特异性CD4+ TH1和CD8+CTL细胞在胞内感0染和肿0瘤的发生0发展过程中具有重要作用,因此成为相关疾病的免0疫学研究和疫0苗研发的重要内容。蛋白抗原(包括灭活病原微生物、肿0瘤细胞裂解物、重组或提取的蛋白抗原、合成肽等)在氢氧化铝等常规佐剂作用下不能有效诱生抗原特异性CD4+TH1和CD8+ CTL反应。细胞免0疫佐剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型水溶性细胞免0疫佐剂,能够作为蛋白抗原佐剂免0疫小鼠诱生有效的抗原特异性CD4+TH1和CD8+ CTL反应。
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