姑苏区红球藻虾青素含量检测

红球藻中虾青素的测定

液相色谱法

1范围

本标准规定了红球藻(Haematococcus)中虾青素的液相色谱测定方法。

本标准适用于雨生红球藻(Haematococcus plurvialis)莱粉中虾青索含量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样经二氯甲烧与甲醇混合溶液提取,氢氧化钠甲醇溶液皂化,使其中的虾青素酯转化成游离态的虾青素,经Csn反相液相色谱柱分离后,用配有紫外检测器的液相色谱仪测定,外标法定量。

4试剂

所用试剂除另有规定外均为色谱纯。

4.1 试验用水应符合GB/T 6682中一级水的要求。

4.2丙酮。

4.3磷酸;优级纯。

4.4氢氧化钠;优级纯。

4.5甲醇。

4.6二氯甲烷。

4.7叔丁基甲基醚。

4.82,6-二叔丁基对甲酚:化学纯。

4.91%磷酸溶液(体积分数):量取10 mL磷酸(4.3)和990 mL水,混匀后备用。

4.10二氯甲烷-甲醇溶液;量取250 mL二氯甲烷和750 mL甲醇,加入 0.5 g2,6-二叔丁基对甲酚(4.8),混匀后备用。

4.11 0.1 mol/L氢氧化钠-甲醇溶液;称取0.4g氢氧化钠(4.4),用甲醇溶解并稀释至100mL,混勾后备用。

4.12 2%磷酸-甲醇溶液(体积分数);量取2mL 磷酸(4.3)和98 mL甲醇,混勾后备用。

4.13全反式虾青素.13-顺虾青素、9-顺虾青素标准品;纯度≥95%。

4.14全反式虾青素标准储备溶液;准确称取全反式虾青素标准品约10 mg,用丙酮溶解并定容于500mL容量瓶中,此溶液浓度为20 ug/mL,充氮密封,置-18℃冰箱中避光保存,有效期1个月.