AMES实验(Ames Test),全称为萨尔克萨斯突变测试(Salmonella mutagenicitytest),是一种用于评估化学物质是否具有致突变性的实验方法。该实验由布鲁斯·艾姆斯(BruceAmes)于1970年代初期开发,主要用于快速筛选潜在的致癌物质。
实验原理
AMES实验基于这样一个原理:许多致癌物质都是通过在体内转化为活性形式(代谢活化)后,与DNA发生反应,导致DNA损伤和突变,从而引发癌症。AMES实验利用了一种特殊的沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)菌株,这些菌株含有突变,使其不能合成组氨酸,无法在不含组氨酸的培养基中生长。
实验步骤
化学物质制备:将待测化学物质溶解在适当的溶剂中。
细菌接种:将特定的沙门氏菌株与待测化学物质混合。
代谢活化系统添加:为了模拟人体内的代谢过程,加入S9肝细胞代谢活化系统(含有来自牛肝的酶,能模拟人体内的代谢过程)。
培养:将混合物在37°C下培养一段时间。
计数突变菌落:将培养后的细菌涂布在含有组氨酸的培养基上,以促进突变菌株的生长。如果化学物质具有致突变性,将观察到野生型细菌恢复合成组氨酸的能力,从而在不含组氨酸的培养基中形成可见的菌落。
结果分析:通过比较化学物质处理组与对照组的菌落数量,评估该化学物质的致突变性。
实验意义
AMES实验是毒理学和食品安全评估中的一个重要工具,它能够快速、经济地筛选出潜在的致癌物和致畸物。由于其高效性,AMES实验被广泛应用于新药开发、农药评估、食品添加剂和工业化学品的安全性评价。
注意事项
溶剂选择:待测化学物质需完全溶解,以确保实验结果的准确性。
剂量范围:需要测试多个剂量,以确定剂量-反应关系。
阳性对照:实验中应包含已知的致突变物质作为阳性对照,以验证实验系统的敏感性。
阴性对照:使用已知非致突变物质作为阴性对照,以确认实验系统的特异性。
结论
AMES实验是一种广泛应用的致突变性筛选实验,它为评估化学物质的遗传毒性提供了一个快速、经济的初步筛选方法。AMES实验不能提供juedui的致癌性预测,但它的结果可以为的毒性研究提供重要线索。