流式细胞检测 细胞检测 细胞STR鉴定 飞凡检测 第三方检测机构

流式细胞检测（FlowCytometry，FCM）是一种生物学技术，主要用于对悬浮于流体中的微小颗粒（特别是细胞）进行计数和分选。以下是关于流式细胞检测的详细介绍：

原理

流式细胞检测通过特定波长的激光束直接照射到高压驱动的液流中，产生的光信号（包括散射光信号和荧光信号）被多个接收器接收。这些信号反映了细胞的物理化学特征，如细胞体积、蛋白质含量、酶活性等。样本细胞需要标记荧光染料或荧光素偶联抗体，以便激光照射后能够发射荧光信号，从而得到细胞的某些化学特征。

组成元素

流式细胞检测主要由三个部分组成：

1. 流式细胞仪：用于检测和分析细胞的光信号。

2. 样品细胞：需要是悬浮于液体的独立细胞，即单细胞悬液。

3. 荧光染料或荧光素偶联抗体：用于标记样本细胞，以便检测。

类型

根据功能不同，流式细胞仪可以分成分析型和分选型流式细胞仪。分析型流式细胞仪只能进行流式分析，而分选型既可以进行流式分析，亦可进行分选和纯化目标细胞。

检测样本类型

流式细胞检测的对象是样本细胞，特别是悬浮于液体的独立细胞。它可以分析来自血液和骨髓的混合细胞群以及可以分离成单个细胞的实体组织，例如淋巴结、脾脏、粘膜组织、实体瘤等。

应用场景

流式细胞检测是一种强大的研究工具，可应用于多个学科，包括：

1. 血液疾病诊断：如白血病、淋巴瘤免疫分析，微小残留病监测，阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断，造血干细胞CD34检测等。

2. 淋巴细胞亚群分析：通过检测淋巴细胞膜表面分化抗原（CD分子），对各淋巴细胞亚群进行分析，计算出淋巴细胞各亚群的百分比，从而对人体细胞免疫状态进行评估。

实验步骤

流式细胞检测的实验步骤主要包括细胞表面标记的检测和细胞内细胞因子的检测两部分，具体步骤如下：

1. 细胞表面标记的检测：

• 试剂平衡至室温，准备实验环境。

• 编号并加入相应的抗体和全血，震荡后室温避光孵育。

• 加入溶血素，震荡后室温避光孵育。

• 离心、洗涤，Zui后加入PBS洗液上机检测。

2. 细胞内细胞因子的检测：

• 准备实验环境，编号。

• 使用无菌无叠氮钠PBS稀释储存液，加入刺激剂。

• 取全血或PBMCs加入刺激剂，混匀后刺激细胞。

• （后续步骤可能包括细胞固定、通透、抗体标记和上机检测等，但具体步骤可能因实验目的和条件而异。）