OECD 442C指南下的直接多肽反应试验(Direct Peptide Reactivity Assay,DPRA)是一种用于评估化学物质皮肤致敏潜力的体外测试方法。DPRA是皮肤致敏性检测的重要工具,特别是在化妆品和化学品安全评估中,它遵循3R原则(替代、减少和优化动物实验)。以下是DPRA的关键要素和应用细节:
试验原理
蛋白质反应性:DPRA通过测试化学物质与特定多肽(半胱氨酸或赖氨酸残基的多肽)的反应性,来模拟化学物质在体内可能与蛋白质的反应,这是皮肤致敏的初步步骤。
两种多肽:使用两种多肽,以覆盖不同类型的反应位点,确保评估的全面性。
非放射性标记:通常采用非放射性方法,如色谱或光谱分析,来测量多肽结合的化合物量。
测试步骤
样品处理:将测试物质与多肽混合,在特定条件下孵育。
结合测定:孵育后,通过化学方法测定多肽上是否结合了测试物质,以及结合的程度。
结果分析:根据结合程度判断化学物质的皮肤致敏潜能,通常结合超过一定阈值被视为具有潜在致敏性。