OECD 442C皮肤致敏性检测 直接多肽结合试验DPRA

OECD 442C指南下的直接多肽反应试验（Direct Peptide Reactivity Assay,DPRA）是一种用于评估化学物质皮肤致敏潜力的体外测试方法。DPRA是皮肤致敏性检测的重要工具，特别是在化妆品和化学品安全评估中，它遵循3R原则（替代、减少和优化动物实验）。以下是DPRA的关键要素和应用细节：

试验原理

蛋白质反应性：DPRA通过测试化学物质与特定多肽（半胱氨酸或赖氨酸残基的多肽）的反应性，来模拟化学物质在体内可能与蛋白质的反应，这是皮肤致敏的初步步骤。

两种多肽：使用两种多肽，以覆盖不同类型的反应位点，确保评估的全面性。

非放射性标记：通常采用非放射性方法，如色谱或光谱分析，来测量多肽结合的化合物量。

测试步骤

样品处理：将测试物质与多肽混合，在特定条件下孵育。

结合测定：孵育后，通过化学方法测定多肽上是否结合了测试物质，以及结合的程度。

结果分析：根据结合程度判断化学物质的皮肤致敏潜能，通常结合超过一定阈值被视为具有潜在致敏性。