GB5009.139-2014是食品安全国家标准中关于饮料中咖啡因测定的标准,以下是对该标准的详细解读:
一、标准概述
标准号:GB 5009.139-2014
发布日期:2014年12月1日
实施日期:2015年5月1日
发布单位:国家卫生健康委员会(原国家卫生和计划生育委员会)
二、适用范围
该标准规定了可乐型饮料、咖啡、茶叶及其固体和液体饮料制品中咖啡因含量的测定方法,即高效液相色谱法。该方法适用于上述饮料制品中咖啡因含量的测定。
三、测定原理
可乐型饮料:脱气后用水提取,再用氧化镁净化。
不含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品:用水提取,再用氧化镁净化。
含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品:用三氯乙酸溶液沉降蛋白后,再进行提取和净化。
咖啡、茶叶及其固体制品:用水提取,再用氧化镁净化。
经过上述处理后的样品,通过C18色谱柱分离,用紫外检测器检测,Zui后以外标法定量测定咖啡因的含量。
四、试剂和材料
除非另有说明,该方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。主要试剂包括:
氧化镁(MgO)
三氯乙酸(CCl3COOH)
甲醇(CH3OH),色谱纯
咖啡因标准品(C8H10N4O2),纯度≥99%
五、仪器和设备
进行咖啡因测定所需的仪器和设备包括:
高效液相色谱仪,带紫外检测器或二极管阵列检测器
天平,感量为0.1 mg
水浴锅
超声波清洗器
0.45 μm微孔水相滤膜
六、分析步骤
试样制备:根据不同类型的饮料制品,采取相应的前处理方法,如脱气、提取、净化等,制备得到试样溶液。
仪器参考条件:设置高效液相色谱仪的色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温、进样量等参数。
标准曲线的制作:将咖啡因标准系列工作液分别注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以标准工作液的浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
试样溶液的测定:将试样溶液注入液相色谱仪中,以保留时间定性,记录峰面积,根据标准曲线得到待测液中咖啡因的浓度。平行测定次数不少于两次。
七、分析结果的表述
试样中咖啡因的含量按公式计算得出,结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,保留三位有效数字。
八、精密度
对于不同类型的饮料制品,该方法的精密度要求有所不同。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的juedui差值不得超过算术平均值的5%(可乐型饮料)或10%(咖啡、茶叶及其固体液体饮料制品)。
九、其他
该方法的线性范围为220 ng/mL~439μg/mL,检出限根据不同类型的饮料制品有所不同。
GB5009.139-2014标准提供了饮料中咖啡因含量的高效液相色谱法测定方法,该方法具有准确度高、精密度好等优点,适用于各种类型饮料制品中咖啡因含量的测定。