以下是关于 《消毒技术规范》（2002年版） 中 消毒剂急性经口毒性试验 的详细操作指南，涵盖试验目的、方法、判定标准及注意事项：
一、试验目的
评估消毒剂一次性经口摄入后对实验动物的急性毒性作用，确定其 半数致死量（LD₅₀） 或 毒性分级，为产品安全使用提供依据。
二、试验标准依据
《消毒技术规范》（2002年版）第三部分2.1.1（急性经口毒性试验）。
参考 GB 15193.3-2014《食品安全国家标准急性经口毒性试验》。
三、试验方法（霍恩氏法/Horn’s Method）
1. 实验动物
物种：健康成年大鼠（shouxuanSPF级SD或Wistar品系）。
数量：每组至少5只，雌雄各半（或单一性别）。
体重：大鼠180-220g，禁食12小时（自由饮水）。
2. 剂量设计
预试验：设4个剂量组（如5000、2500、1250、625mg/kg），观察24小时死亡情况。
正式试验：根据预试验结果，选择4-5个等比剂量（如5000、3000、1000、500 mg/kg）。
3. 给药方式
灌胃法：
消毒剂用蒸馏水或植物油配制成适宜浓度（避免过浓刺激消化道）。
按动物体重计算给药体积（通常1-2 mL/100g）。
一次性灌胃后，正常饲喂观察。
4. 观察周期
14天，记录：
死亡时间、中毒症状（如抽搐、腹泻、呼吸困难）。
体重变化、脏器（肝、肾、胃肠）病理检查。
四、结果判定与分级
1. LD₅₀计算
采用 霍恩氏法 或 Bliss法 计算半数致死量（LD₅₀）。
公式（霍恩氏法）：
LD50=log−1[��−�(∑�−0.5)]LD50=log−1[Xm−i(∑p−0.5)]
（��Xm：Zui高剂量对数；�i：剂量对数间距；�p：死亡率）。
2. 毒性分级（WHO标准）
| LD₅₀（大鼠经口） | 毒性级别 | 安全警示 |
|---|---|---|
| ≤5 mg/kg | 剧毒 | 严禁直接接触 |
| 5-50 mg/kg | 高毒 | 需严格防护 |
| 50-500 mg/kg | 中等毒 | 限制使用范围 |
| 500-5000 mg/kg | 低毒 | 按说明使用 |
| ＞5000 mg/kg | 实际无毒 | 无需特殊防护（仍需安全性评估） |
五、试验报告内容
消毒剂名称、理化性质、配制方法。
动物品系、性别、体重、剂量组设计。
中毒症状、死亡时间、LD₅₀值及95%可信限。
病理学检查结果（如脏器充血、坏死）。
六、注意事项
伦理要求：
遵循 《实验动物福利伦理审查指南》（GB/T35892-2018），减少动物痛苦。
浓度控制：
腐蚀性消毒剂（如含氯制剂）需稀释至非腐蚀浓度，避免机械性损伤干扰结果。
环境条件：
实验室温度22±3℃，湿度50±10%，12小时光暗循环。
八、常见问题
Q1：若LD₅₀＞5000 mg/kg，是否无需试验？
需补充 急性经皮毒性试验 和 刺激性试验（如消毒技术规范2.1.2-2.1.3）。
Q2：消毒剂为固体如何操作？
研磨后混入饲料或制成悬浮液灌胃，需标明Zui大溶解浓度。
Q3：可否用小鼠替代大鼠？
可以，但需调整剂量（小鼠代谢更快，LD₅₀可能偏低）。
