SN/T 3979-2014 乳与乳制品β-内酰胺酶检测

SN/T 3979-2014《乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定方法 杯碟法》是针对乳制品中β-内酰胺酶检测的出入境检验检疫行业标准，采用杯碟法通过抑菌圈差异定性判定酶活性，适用于生鲜乳、纯牛奶、酸奶、奶粉等乳制品的检测，具有操作标准化、结果直观、成本较低等优势，但需结合其他方法实现更全面的风险评估。

一、标准基本信息

• 标准号：SN/T 3979-2014

• 标准名称：乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定方法 杯碟法

• 发布日期：2014年7月14日

• 实施日期：2015年3月1日

• 主管部门：国家认证认可监督管理委员会

• 适用范围：适用于生鲜乳、纯牛奶、酸奶、奶粉等乳及乳制品中β-内酰胺酶的检测。

二、检测方法原理

杯碟法是一种琼脂扩散生物检定法，其原理基于青霉素敏感菌株与β-内酰胺酶抑制剂的相互作用。通过检测琼脂培养基中形成的抑菌圈差异，可以间接判定样品中是否含有β-内酰胺酶。具体来说，如果样品中含有β-内酰胺酶，它会水解青霉素，导致抑菌圈变小或消失；如果样品中不含β-内酰胺酶，则抑菌圈会正常形成。

三、检测步骤与操作要点

1. 样品采集与处理：确保样品的代表性和真实性，避免污染。对于乳制品，可能需要进行适当的稀释或预处理，以便于后续分析。

2. 培养基制备：按照标准要求配制营养琼脂培养基和抗生素检测培养基Ⅱ，并进行高压灭菌处理。

3. 菌种接种：将标准菌株（如藤黄微球菌）接种到培养基上，并培养至对数生长期。

4. 杯碟放置与加样：在培养基上放置不锈钢检测管（杯碟），并向管内加入样品和β-内酰胺酶抑制剂（如舒巴坦）。设置对照组，只加入样品或只加入抑制剂。

5. 培养与观察：将培养基置于适宜的温度下培养一段时间（如16-18小时），观察并测量抑菌圈的直径。

6. 结果判定：通过比较加入抑制剂与未加入抑制剂的样品所产生的抑菌圈大小，可以间接测定样品是否含有β-内酰胺酶。

四、标准意义与应用

• 保障乳制品安全：β-内酰胺酶是一种能够水解β-内酰胺类抗生素的酶，如果乳制品中非法添加了这种酶，可能会导致抗生素残留超标，对人体健康造成潜在危害。通过SN/T 3979-2014标准检测乳制品中的β-内酰胺酶，可以有效保障乳制品的安全性和质量。

• 规范市场秩序：该标准为乳制品中β-内酰胺酶的检测提供了统一的方法和依据，有助于规范市场秩序，打击非法添加行为。

• 促进国际贸易：符合guojibiaozhun和规范的要求，有助于提升我国乳制品在国际市场上的竞争力。

五、实际操作中的注意事项

• 严格质量控制：在检测过程中，需要严格控制实验条件，如培养基的配制、菌种的接种量、培养温度和时间等，以确保实验结果的准确性和可靠性。

• 避免交叉污染：在样品采集、处理和检测过程中，需要采取有效的措施避免交叉污染，如使用一次性器具、定期清洁实验设备等。

• 结合其他方法进行综合分析：杯碟法是一种有效的检测方法，但可能存在一定的局限性。在实际应用中，可以结合其他检测方法（如高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法等）进行综合分析，以提高检测的准确性和灵敏度。