二丁基羟基甲苯通常指2，6-二叔丁基对甲酚（简称BHT），化学式C15H24O，分子量220.35，CAS号[128-37-0]，性状为无色、白色或类白色结晶或结晶性粉末，在丙酮中极易溶，在乙醇中易溶，在水或丙二醇中不溶，是一种常见的脂溶性抗氧剂，稳定性高抗氧化能力强，常用于食品、保健品、药品中。
在药物制剂领域，抗氧剂的应用可能会导致药物制剂的稳定性和功效性等方面得不到保障，药物中抗氧化剂需要准确的定量，根据2020版中国药典收录，二丁基羟基甲苯照高效液相色谱法（通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（9：1）为流动相，检测波长为278nm。理论板数按二丁基羟基甲苯峰计算不低于3000。测定法取本品约20mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取二丁基羟基甲苯对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
参照药典通过利用高效液相色谱，实验室检测制剂中二丁基羟基甲苯含量的方法。色谱条件选择C18色谱柱，流动相为甲醇-水（9：1）；检测波长：278nm；柱温35℃；流速：1.0mL/min；进样量：20μL。精密量取二丁基羟基甲苯对照品约10mg置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀得到二丁基羟基甲苯储备液，精密吸取1mL置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀配制称取原料药约适量0.2mg，置20mL容量瓶中，加适量甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，分层取上清液。按制剂组成及工艺制备不含二丁基羟基甲苯的空白辅料做空白。
分别取配置对照品溶液、供试品溶液、空白溶液进样检测，记录色谱图，空白溶液在主峰位置无干扰。精密称量二丁基羟基甲苯对照品10.87mg置100mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制得对照储备液，用甲醇溶液逐级稀释，制得不同浓度的对照品溶液。进样记录色谱图，以峰面积（y）对浓度（x）进行线性回归，得回归方程。
取对照品溶液（10μg/mL）重复进样6次，取同一批的样品平行制备6份供试品溶液，按进样记录峰面积计算含量。结果表明，在范围内二丁基羟基甲苯峰面积与浓度呈良好线性关系，精密度高重复性好回收率符合实验要求，取三批样品配制供试品溶液，进样计算含量。
