饲料中嗜酸乳杆菌的微生物学检验
1范围
本标准规定了饲料中嗜酸乳杆菌数的测定及鉴定方法。
本标准适用于含有有益微生物嗜酸乳杆菌的各种饲料中嗜酸乳杆菌数量的测定。
6.2操作步骤
6.2.1以无菌操作将经过充分摇匀的试料25g(或25 mL)放入含有225mL灭菌生理盐水(见第A.7章)的灭菌广口瓶内配成1∶10的均匀稀释液。
6.2.2用1 mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1 mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水(见第A.7章)的试管内(注意吸管**不要触及管内稀释液)。
6.2.3另取1 mL灭菌吸管,按上述操作顺序,作10倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用1支1 mL灭菌吸管。
6.2.4︰选择2个~3个以上适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿(3.7)内,每个稀释度作两个平皿。
6.2.5稀释液移人平皿后,应即时将冷至50℃的改良MC培养基(4.1)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。将计数培养基倾入加有1mL稀释液试料用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对照,以上整个操作自培养物加入培养皿开始至接种结束须在20 min内完成。
6.2.6待培养基凝固后,翻转平板,置36℃±1℃恒温培养箱(3.1)内培养72 h士1h取出,观察菌落特征,选取菌落数在30~~300之间的平板进行计数。