飞凡检测干细胞三向诱导分化服务:包括脂肪间质干细胞成脂诱导分化的基础培养基、优质胎牛血清及培养因子,可增强脂肪间质干细胞向成脂细胞方向诱导分化的能力;
干细胞成软骨诱导分化的基础培养基和添加物;
干细胞成骨诱导分化的基础培养基、优质胎牛血清及培养因子,可增强骨髓间质干细胞向成骨细胞方向诱导分化的能力。
提供40倍、100倍、200倍等各种染色图片
提供流式指标鉴定,包括对CD105、90、45、34、CD73和HLA-DR六个指标进行鉴定服务,技术纯属、经验丰富、时间短、数据可靠。
飞凡检测成骨诱导分化
成骨诱导分化操作规程
所需材料
0.25%Trypsin-0.02%EDTA
1×PBS
iCell 骨髓间质干细胞完全培养基
iCell 骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基操作
注:本操作规程以六孔板为例
1. 将 iCell 骨髓间质干细胞置于 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
2. 当细胞融合度达到 80-90%时,用 0.25%Trypsin-0.02%EDTA 进行消化。
3. 将消化下来的骨髓间质干细胞按照 1×105 cells/cm2 的细胞密度接种在事先包被基质胶的六孔板中,每孔加入 2 mL完全培养基。。
4. 将细胞置于 37℃,5% CO2 的培养箱中进行培养。
5. 当细胞融合度达到 60%-70%时,小心的将孔内完全培养基吸走,向六孔板中加入2 mL iCell骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基。
6. 每隔 3 天换用新鲜的 iCell 骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基(使用前需预热至 37℃)
7. 诱导 2-4 周后,视细胞的形态变化及生长情况,用茜素红进行染色。
注:为防止成骨细胞脱落,建议成骨过程中出现大量钙结节之后,换液形式变为每两天一次半量换液。
茜素红染色分析
所需材料
1×PBS
4%中性甲醛溶液
茜素红染液
实验步骤
1. 成骨诱导分化结束后,吸走六孔板中的成骨诱导分化完全培养基,用 1×PBS 冲洗
1-2 次。每孔加入 2 mL 4%中性甲醛溶液,固定 30 min。
2. 吸走中性甲醛溶液,用 1×PBS 冲洗 2 次。每孔中加入 1 mL 茜素红染液染 3-5 min。
3. 吸走茜素红染液,用 1×PBS 冲洗 2-3 次。
4. 将培养板置于显
5. 微镜下观察成骨染色效果。
飞凡检测成软骨诱导分化
成软骨诱导分化操作规程
1. 进行成软骨诱导分化实验之前,需要对常规消化后的细胞进行计数。
2. 将3-4×10 5个细胞转移到15 mL离心管中,250 g离心4 min。
3. 吸去上清。加入0.5 mL预混液,重悬上一步离心所得沉淀,以清洗ICELL间质干细胞,室温下150 g离心5 min。
4. 重复步骤3,清洗细胞。
5. 将上一步所得沉淀用0.5 mL 间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基重悬。
6. 室温下150 g离心5 min。
7. 拧松离心管盖以便于气体交换,将其放置于37℃,5% CO2的培养箱中培养。