成脂诱导分化 干细胞成软骨诱导分化 骨髓基质干细胞诱导分化

飞凡检测干细胞三向诱导分化服务：包括脂肪间质干细胞成脂诱导分化的基础培养基、优质胎牛血清及培养因子，可增强脂肪间质干细胞向成脂细胞方向诱导分化的能力；

干细胞成软骨诱导分化的基础培养基和添加物；

干细胞成骨诱导分化的基础培养基、优质胎牛血清及培养因子，可增强骨髓间质干细胞向成骨细胞方向诱导分化的能力。

提供40倍、100倍、200倍等各种染色图片

提供流式指标鉴定，包括对CD105、90、45、34、CD73和HLA-DR六个指标进行鉴定服务，技术纯属、经验丰富、时间短、数据可靠。

飞凡检测成骨诱导分化

成骨诱导分化操作规程

所需材料

0.25%Trypsin-0.02%EDTA

1×PBS

iCell 骨髓间质干细胞完全培养基

iCell 骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基操作

注：本操作规程以六孔板为例

1. 将 iCell 骨髓间质干细胞置于 37℃，5% CO2 的培养箱中培养。

2. 当细胞融合度达到 80-90%时，用 0.25%Trypsin-0.02%EDTA 进行消化。

3. 将消化下来的骨髓间质干细胞按照 1×105 cells/cm2 的细胞密度接种在事先包被基质胶的六孔板中，每孔加入 2 mL完全培养基。。

4. 将细胞置于 37℃，5% CO2 的培养箱中进行培养。

5. 当细胞融合度达到 60%-70%时，小心的将孔内完全培养基吸走，向六孔板中加入2 mL iCell骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基。

6. 每隔 3 天换用新鲜的 iCell 骨髓间质干细胞成骨诱导分化完全培养基（使用前需预热至 37℃）

7. 诱导 2-4 周后，视细胞的形态变化及生长情况，用茜素红进行染色。

注：为防止成骨细胞脱落，建议成骨过程中出现大量钙结节之后，换液形式变为每两天一次半量换液。

茜素红染色分析

所需材料

1×PBS

4%中性甲醛溶液

茜素红染液

实验步骤

1. 成骨诱导分化结束后，吸走六孔板中的成骨诱导分化完全培养基，用 1×PBS 冲洗

1-2 次。每孔加入 2 mL 4%中性甲醛溶液，固定 30 min。

2. 吸走中性甲醛溶液，用 1×PBS 冲洗 2 次。每孔中加入 1 mL 茜素红染液染 3-5 min。

3. 吸走茜素红染液，用 1×PBS 冲洗 2-3 次。

4. 将培养板置于显

5. 微镜下观察成骨染色效果。

飞凡检测成软骨诱导分化

成软骨诱导分化操作规程

1. 进行成软骨诱导分化实验之前，需要对常规消化后的细胞进行计数。

2. 将3-4×10 5个细胞转移到15 mL离心管中，250 g离心4 min。

3. 吸去上清。加入0.5 mL预混液，重悬上一步离心所得沉淀，以清洗ICELL间质干细胞，室温下150 g离心5 min。

4. 重复步骤3，清洗细胞。

5. 将上一步所得沉淀用0.5 mL 间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基重悬。

6. 室温下150 g离心5 min。

7. 拧松离心管盖以便于气体交换，将其放置于37℃，5% CO2的培养箱中培养。