飞凡生物依据多年的病毒包装平台经验,可提供不同质量标准的慢病毒(LV)包装服务,广泛运用到各种细胞系模型的构建,特别对于较难感染的原代细胞,如T细胞和NK细胞。针对CAR-T细胞治疗,我们还可提供不同靶点的CAR分子设计服务,满足CAR-T及细胞治疗研究者的个性化需求。
CAR分子设计
scFv筛选:利用抗体开发和筛选,选出3-5个结合亲和力合适的scFv分子
连接基团(Linker)的优化:设计不同长度的Linker,使VH和VL之间的灵活度增加,进而影响结合亲和力
铰链区(Hinge)的优化:设计不同长度的Hinge,增加抗原结合域的空间灵活度
共刺激结构域的选择:可选择不同的共刺激分子(如4-1BB或CD28等)
报告基因:可连接绿色荧光蛋白基因,表征CAR分子是否转导成功
服务案例
CD19抗原慢病毒滴度检测-飞凡检测
将表达CD19抗原的慢病毒纯化液进行梯度稀释(0.01、0.1、1、10μL四个梯度),分别加入到相同数量的293T细胞中,72小时后流式检测293T细胞阳性率(即被慢病毒感染的293T细胞占细胞总数的百分比),进而计算慢病毒的转导滴度。如图所示,CD19抗原阳性细胞的数量随转染病毒梯度的增加而逐渐升高,表明该慢病毒有良好的感染活性,并计算病毒滴度为:1.4×108TU/mL。