食品中蜡样芽胞杆菌的检测是一个重要的食品安全环节,旨在预防由该菌引起的食源性疾病。以下是基于提供的参考内容,对蜡样芽胞杆菌检测流程的详细说明:
检测标准
主要遵循GB 4789.14-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验》。
样品准备与处理
样品采集:确保无菌条件下采集样品。
样品制备:称取25g样品,加入225mL生理盐水或PBS,使用均质器进行均质处理,制备1:10的样品匀液。
样品稀释:从1:10的匀液开始,进行十倍递增稀释,以适应不同污染程度的样品。
平板计数法
接种:选择适宜稀释度的样品匀液,接种到MYP琼脂平板上,使用无菌L棒均匀涂布。
培养:在30°C下培养24小时,观察典型菌落。
MYP琼脂上的蜡样芽胞杆菌菌落特征为粉红色,可能有或没有溶血环。
确证试验
挑取菌落:从平板上挑取疑似蜡样芽胞杆菌菌落。
纯培养:在营养琼脂上进行纯培养。
生化鉴定:包括但不限于染色镜检、动力试验、溶血试验、根状生长试验、溶菌酶耐性试验和蛋白质毒素结晶试验等,以确认其身份。
毒力基因检测(可选):对于的研究或特定需求,可进行毒力基因的PCR检测。
结果计算与报告
根据平板上的菌落数,计算蜡样芽胞杆菌的CFU/g或CFU/mL,并结合GB4789.14或其他适用的限量标准来判断是否合格。