饲料中赭曲霉毒素A的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法
1范围
本标准规定了饲料中赭曲霉毒素A的免疫亲和柱净化-高效液相色谱测定方法。本标准适用于饲料原料﹑配合饲料、浓缩饲料、精料补充料中赭曲霉毒索A的测定。本标淮定量限为5.0ug/kg.
2规范性引用文件
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GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1饲料采样
GB/T20195动物饲料试样的制备
3原理
试样经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有赭曲霉毒索A特异的免疫亲和层析柱层析净化,用PES缓冲液和纯水清洗,甲醇洗脱﹐洗脱液通过带荧光检测页的高效液相色谱仪测定赭曲霉毒素A的含量。
4试剂
除特殊说明外,所用试剂均为分析纯试剂,用水符合GB/T 6682中二级用水的规定。4.1甲醇:色谱级。
4.2乙腈:色谱级。
4.3氯化钠。
4.4磷酸氢二钠。
4.5磷酸二氢钾。
4.6氯化钾。
4.7。4.8碳酸氢钠。
4.9吐温-20(Tween-20)。
4.10乙酸。
动物:奶牛饲料,猪饲料,鱼饲料,鸡饲料,宠物饲料
其他:免税饲料,青贮饲料,彭化饲料,浓缩饲料,豆粕,豆饼
状态:粉状饲料,颗粒饲料,块状饲料,粒状饲料
营养:能量饲料,蛋白质饲料,矿物质饲料,发酵饲料饲料原料:鱼粉, 乳清粉,肉骨粉,棉籽,秸秆,麸皮,花生粕，
棉仁饼，苗蓿,菜籽粕,米糖粕,蚕蛹粉,羽毛粉,代乳粉,沸石粉,蒙脱石
检测项目包括感官指标、理化指标、微生物指标、卫生指标、其他指标等。
感官指标:色泽、气味滋味、硬度,粘稠性,状态,杂质检测、混合均匀度测定等。
理化指标:水分、PH值、酸价测定、过氧化值、粗蛋白质、 粗灰分、 粗脂肪检测、 粗纤维检测、氯化物测定脂肪酸检测、
氨基酸检测、钙含量、溶解度检测、磷含量、营养成分检测、 元素含量、挥发性盐基氮等。
微生物指标:菌落总数.大肠菌群、霉菌检测和酵母菌、致病菌检测，商业无菌检测等。
卫生指标:重金属检测、饲料添加剂检测农兽药残留检测、三聚氰胺检测、 玉米霉烯酮检测呕吐毒素检测黄曲毒
素检测、组胺检测、生物胺检测、多磷酸盐、动物源性检测等。
其他指标:成分含量检则、指标检测、成分分析、配方还原等。
各类禽畜水产饲料。饲料原粮，饲用酶制剂和宠物食品等
动物性蛋白饲料(如鱼粉、肉骨粉、乳清粉、代乳粉等)
