戊聚糖广泛存在于麸皮、秸秆等农业废弃物中,而我国每年产生的近百亿吨农业废弃物,大都因为没有有效提取利用这些废弃物中活性成分,而造成大规模的资源浪费。对于这些农业废弃物,一般采用的是浅层粗放形式进行处理,由此造成的环境污染问题也十分严峻。如何开发这些农业废弃物中戊聚糖,进行产业化应用,就成为很多研究机构研发讨论的重点课题。
戊聚糖是植物纤维原料检测中的非淀粉多糖之一,在谷物加工过程,也是影响产品品质的重要功能性成分。在生理功能上,戊聚糖具有润肠通便、降血糖、降血脂、增强免疫、减肥和降低结肠癌风险等作用,尤其是在对肠道菌群中相关水解酶的代谢起到抑制作用,戊聚糖可以发展成为慢发酵型潜在益生元,在保健功效上具有一定研究价值,戊聚糖还作为增稠剂和保湿剂,应用在冰淇淋、饮料、调味品、乳制品等食品行业。
需求背景
沈阳某研究院委托我们检测一批植物源产品中的戊聚糖含量。现有标准大多都是针对动物饲料、酒、纸浆及谷物中戊聚糖含量的测定,而对于植物源产品中戊聚糖含量测定的国家标准尚未制定。我们在了解了市场当前含戊聚糖成分的植物源产品情况,系统分析了国内外戊聚糖含量测定实验方法,并对相关的标准和方法进行了收集整理,制定了以下方案。
主要试验步骤
1.试验设计
试验设计分成平行试验和空白实验。平行试验的所有样品平行做两份试验。空白实验不加试样,用于衍生化试验。每批样品(少于20个)或每20个样品做一个空白试验
2.酶解
准确量取液态样品0.5mL,或称取固态样品50mg于25mL的蒸馏水(pH=6.0)中,搅拌至完全溶解。称取6.0mg木聚糖酶,溶解于5mL蒸馏水中,待酶溶解后加入到戊聚糖样品溶液,40℃水浴加热振荡反应50min。样品冷冻干燥,待衍生。
3.衍生化
待衍生物加入10.0 mg,0.5 mL吡啶,振荡溶解,移入烘箱,90℃反应30 min,取出冷却至室温。加入0.5mL醋酸酐,于90℃烘箱反应30 min。衍生化后溶液加入甲醇定容,溶液摇匀后过有机滤膜,滤液待上机测定。
4.测定及绘制曲线
采用逐级减少的方法称取阿拉伯糖和木糖单糖,并进行衍生化实验。衍生化后溶液用于气相色谱—质谱联用仪进行定量分析。根据所用气相色谱—质谱联用仪的性能及待测试样的实际情况选择**的测试条件测定衍生化后溶液,取样品衍生溶液1μL注入气相色谱质谱联用仪中,记录总离子流质谱图和选择离子质谱图,对定量选择离子进行峰面积积分,外标法定量。以峰面积A为纵坐标,相应浓度c为横坐标,绘制标准工作曲线,每次都应该使用已知的校准化合物对仪器进行*优化处理,使仪器的灵敏度、稳定性和分离效果处于**状态。