脯氨酸(Proline,Pro)是人和多种哺乳动物的非必需氨基酸,可以通过谷氨酸合成(通过3步酶反应)或者谷氨酰胺代谢,也可以通过鸟氨酸、精氨酸的合成。在使用脯氨酸缺乏饲料(proline-deficientdiet)喂养大鼠后观察到,肾脏可以通过精氨酸合成脯氨酸,而当脯氨酸浓度升高时,肾脏吸收脯氨酸。
可以脯氨酸主要存在于结构性蛋白中,包括肌腱、皮肤等组织。
在小猪和鸡中,脯氨酸是必需氨基酸。研究观察到,脯氨酸合成不能满足机体的需要,从而需要在饲料中提供一部分脯氨酸。当喂脯氨酸缺乏饲料时,血液中脯氨酸水平下降。
脯氨酸在结构蛋白合成和信号转导中发挥作用。脯氨酸对于动脉粥样硬化斑块形成有对抗作用,在已经形成的动脉粥样硬化斑块中,脯氨酸能够促进脂肪释放。
实验材料,主要仪器和试剂
1.实验材料
植物组织。2.主要仪器(1)分光光度计(2)水浴锅
(3)大试管( 18mm×200mm)(4)具塞刻度试管(20mL)
3.试剂
(1)酸性茆三酮溶液:称取1.25g 茆三酮溶于30mL冰乙酸和20mL6M磷酸溶液中,搅拌加热(低于70℃)溶解,冷却后置棕色瓶中,4℃保存可使用2-~3天。
(2)80%乙醇(分析纯)。
(3)脯氨酸标准溶液:称取10mg 胎氨酸,用少量80%乙醇溶解,蒸馏水定容至100mL( 100ug/mL)。再用蒸馏水释释成1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0u g/mL的系列溶液。
四、操作步骤
1.脯氨酸标准曲线制作
取7支具塞试管,分别加入各浓度的标准脯氨酸系列溶液2mL,冰乙酸2mL,茆三酮溶液2mL,混匀后沸水浴中加热20min,冷却后,以О号管为对照在515nm光波长下比色测定光密度。以光密度ODs15mm为纵坐标,脯氨酸含量为横坐标,绘制标准曲线。