《食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验》本书是是中华人民共和国卫生部、中国国家标准化管理委员会颁布的国家标准。本标准规定了副溶血性弧菌检验方法。本标准适用于动物性水产干制品、腌醉制生食动物性水产品、即食藻类食品、鱼糜制品等水产食品和水产调味品以及中毒样品副溶血性弧菌的检验。
食品安全国家标准(GB 4789.7-2013)中描述了对食品中副溶血性弧菌做定性/定量检测的方法。
该方法采用3%氯化钠碱性蛋白胨水增菌液进行增菌后,接种于TCBS或弧菌显色培养基,使包括副溶血性弧菌在内的嗜盐性弧菌得以分离。
可疑菌落经氧化酶试验、3%氯化钠三糖铁斜面、革兰氏染色和嗜盐性实验进行初步判定,*后可选择生化、鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统确定其是否为副溶血性弧菌。
操作步骤如下:
一/分离培养
以无菌操作取样品25g(mL),加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225mL,用旋转刀片式均质器以8000r/min均质1min,或拍击式均质器拍击2min,制备成1:10的样品匀液。于36℃±1℃培养8h~18h。
对所有显示生长的增菌液,用接种环在距离液面以下1cm内沾取一环增菌液,于TCBS平板或弧菌显色培养基平板上划线分离。一支试管划线一块平板。于36℃±1℃培养18h~24h。
典型的副溶血性弧菌在TCBS上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似口香糖的质感,直径2mm~3mm。
从培养箱取出TCBS平板后,应尽快(不超过1h)挑取菌落或标记要挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在弧菌显色培养基上的特征按照产品说明进行判定。