食品安全国家标准食品微生物学检验常见产毒霉菌的形态学鉴定
1范围
本标准规定了食品中常见产毒真菌的鉴定方法。
本标准适用于曲霉属(As pergillus ),青霉属(Penicillium ),镰刀菌属(Fusarium)及其他菌属中常见产毒真菌的鉴定。
4操作步骤
4.1菌落特征观察:为了培养完整的菌落以供观察记录,可将纯培养物点种于平板上。曲霉,青霉通常接种查氏培养基,镰刀菌通常需要同时接种多种培养基,其他真菌一般使用马铃薯-葡萄糖琼脂培养基。将平板倒转,向上接种一点或三点,每个菌株接种两个平板﹐正置于25℃±1℃恒温培养箱中进行培
养。当刚长出小菌落时,取出一个平皿以无菌操作,用灭菌不锈钢小刀或眼科手术小刀将菌落连同培养基切下l cm× 2cm的小块,置菌落一侧,继续培养,于5 d~14 d进行观察。此法代替小培养法,可观察子实体着生状态。
4.2︰斜面观察:将真菌纯培养物划线接种(曲霉,青霉)或点种(镰刀菌或其菌)于斜面,培养5 d~14d,观察菌落形态,同时还可以直接将试管斜面置低倍显微镜下观察孢子的形态和排列。
4.3制片:取载玻片加乳酸苯酚液一滴,用接种钩取一小块真菌培养物,置乳酸-苯酚液中,用两支分离针将培养物轻轻撕成小块,切忌涂抹,以免破坏真菌结构。然后加盖玻片,如有气泡,可在酒精灯上加热排除。制片时应在生物安全柜或无菌接种罩或接种箱或手套箱内操作以防孢子飞扬。
4.4镜检:观察真菌菌丝和孢子的形态.特征﹑孢子的排列等,并记录。
